2 × Taq PCR MasterMix Ⅱ
Toetoetra
■ Fahombiazan'ny fanamafisana avo lenta: Ny sombin'ny ADN misy habe samihafa (ambany noho ny 5 kb) ary ny loharano dia azo ampitomboina tsara.
■ Fihetseham-po avo: ambany noho ny 10 pg ny sombintsombiny kendrena azo ampitomboina avy amin'ny môdely génomika.
■ Fanoherana ny adin-tsaina avo: Ho an'ny môdely misy atiny maloto ambony toy ny modely / kolontsaina bakteria azo alaina, dia azo esorina tsara ny sombin-javatra kendrena. Ny hetsika polymerase dia tsy hisy fiantraikany amin'ny hatsiaka miverimberina sy ny fanalefahana.
■ Mora ho an'ny fampiharana: voaomana mora sy haingana ny rafitry ny fihetsika. Ny sombina nohamafisina dia misy ny 3 ′ end dA-overhang, izay mety amin'ny klona TA.
famaritana
Karazana: Taq polymerase ADN
Santionany: Kolontsaina modely / bakteria namboarina / nalaina an-keriny
Modely: > 10 pg
Haben'ny sombin-javatra: <5 kb
Fampiharana: Fanamafisana PCR ny sombintsombin'ny ADN, fanoratana marika ADN, fanitarana voalohany, famaritana ny filaharana, fitiliana générique lehibe, fanandramana PCR semi-qualité, fitiliana ny DNA trace, sns.
Ny vokatra rehetra dia azo namboarina ho an'ny ODM / OEM. Ho an'ny antsipiriany,azafady tsindrio ny Serivisy namboarina (ODM / OEM)
 |
Sary 1. Ireo modely avy amin'ny loharanom-pahalalana tsy mitovy dia nohamafisin'ny TIANGEN Taq MasterMix II sy ny Taq Mix iraisan'ny mpamatsy TR tsirairay avy mba hahitana ny fanoherana ny adin-tsaina ataon'ny reagents. Ny valiny dia mampiseho fa ny vokatra TIANGEN dia afaka manitatra ireo sombintsombiny lasibatra avy amin'ny môdely génomika sy ny kolontsaina bakteria, ary ny fanoherana ny fihenjanana dia tsara kokoa noho ny an'ny Supplier TR. A: Modely génomika maloto nalaina avy amin'ny TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit. Prp / DN: fitrandrahana solika sy fikarohana ny santionan'ny ràn'olombelona. Vary: fitrandrahana solika sy fitadiavana santionam-bary. B: Colony PCR. Ny sombintsombin'ny PCR dia 700 bp. M: TIANGEN Marker III |
 |
Universality tsara ho an'ny modely avy amin'ny loharano samihafa ary manana halava samy hafa Sary 2. Ny sombin'ny loharano sy ny halavany samihafa dia nohamafisina tamin'ny alàlan'ny TIANGEN Taq MasterMix II (A) ary mahazatra Taq Afangaroy ny mpamatsy TK (B), mpamatsy TR (C), mpamatsy V (D) ary mpamatsy G (E). Ny valiny dia mampiseho fa ny fahombiazan'ny vokatra TIANGEN no tsara indrindra amin'ny fahaiza-mampitombo, ny maha-manokana azy ary ny maha-olona azy rehetra. 2-3: Modely ADN genomika vary (694 bp, 2258 bp); 4: Modely ADN genomika landihazo (200 bp); 5: Escherichia coli modely ADN genomika (2298 bp); 6-7: Modely ADN genome totozy (1 kb, 2 kb); 8-10: Modely ADN genomika voalavo (1 kb, 2 kb, 2080 bp); 11-18: Drafitra ADN momba ny genome olombelona (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp, 1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb) |
 |
Fahatsapana avo Sary 3. Ny firafitry ny raty sy ny sangan'olombelona ADN dia nohamafisina tamin'ny fampiasana TIANGEN Taq MasterMix II (A), mahazatra Taq Afangaro ny mpamatsy V (B) sy mpamatsy TK (C), mba hahitana ny fahatsapana ny fanamafisana. Ny valiny dia mampiseho fa ny vokatra TIANGEN dia afaka manitatra ny sombintsombiny lasibatra avy amin'ny môdely génome hatramin'ny 0,01 ng, ary ny fahatsapany dia tsara kokoa noho ny an'ny vokatra avy amin'ny mpamatsy V sy TK.M: TIANGEN Marker III, N: NTCTemplate input 1-8 : 200 ng, 100 ng, 50 ng, 20 ng, 10 ng, 1 ng, 0,1 ng, 0,01 ng. |
Modely A-1
■ Ny môdely dia misy fahalotoana proteinina na mpanakana Taq, sns .——Ataovy ny môdely ADN, esory ny fahalotoan'ny proteinina na esory ny modely ADN miaraka amina kitapo fanadiovana.
■ Tsy feno ny denaturation an'ny môdely —— Ampitomboina araka ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny denaturation ary halavaina ny fotoana maha-denaturation.
■ Fanimbana ny môdely —— Amboary indray ny modely.
A-2 Primer
■ Ratsy kalitaon'ny primera ——Avao-synthesize ny primer.
■ Fanapotehana ny primer ——Aokao ireo primera fitanana avo lenta ho kely kely hitehirizana azy. Sorohy ny hatsiaka be loatra sy ny fanalefaka na 4 ° C maharitra maharitra.
■ Famolavolana primer tsy mety (oh: ny halavan'ny primer tsy ampy, dimer miforona eo anelanelan'ny primers sns.
A-3 Mg2+fitanana
■ Mg2+ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg2+ fifantohana: Manatsara ny Mg2+ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra2+ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.
A-4 mari-pana amin'ny Annealing
■ Ny mari-pana amin'ny annealing avo dia misy fiatraikany amin'ny famehezana ny primer sy ny modely. ——Ahena ny mari-pana mampifangaro ary manatsara ny toe-javatra amin'ny alàlan'ny gradient 2 ° C.
A-5 Fotoana fanitarana
■ Fotoana fanitarana fohy —— Ampitomboy ny fotoana fanitarana.
Phenomena: ny santionany ratsy dia mampiseho ireo tarika lasibatra kendrena.
A-1 Fandotoana ny PCR
■ Fandotoana ny filaharan'ny tanjona na ny fanamafisana ny vokatra —— Tandremo sao ampifangaroina ny santionany misy ny filaharana kendrena ao amin'ilay santionany ratsy na arotsaka ao anaty fantsona centrifuge. Ny reagents na ny fitaovana dia tokony autoclaved hamongorana ny asidra niokika misy, ary ny fisian'ny fandotoana dia tokony ho faritana amin'ny alàlan'ny fanandramana fanaraha-maso ratsy.
■ Fandotoana reagent ——Aroquot ny reagents ary tahirizo amin'ny hafanana ambany.
A-2 Primer
■ Mg2+ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg2+ fifantohana: Manatsara ny Mg2+ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra2+ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.
■ Famolavolana primer tsy mety, ary ny filaharana kendrena dia misy homolojia miaraka amin'ny filaharana tsy kendrena. —— primera famolavolana indray.
Phenomena: Ny tariby fanamafisana PCR dia tsy mifanaraka amin'ny haben'ny antenaina, na lehibe na kely, na indraindray samy misy tarika fanamafisana manokana sy tarika fanamafisana tsy voafaritra.
Primer A-1
■ Tsy fahaiza-manao voalohany
—— Primera famolavolana indray.
■ Avo loatra ny fatran'ny primer ——Mampiakatra tsara ny mari-pana amin'ny denaturation ary mampaharitra ny fotoana maha-denaturation.
A-2 Mg2+ fitanana
■ Ny Mg2+ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny fatran'ny Mg2 +: Manatsara ny Mg2+ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra2+ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.
A-3 Polymerase maharitra
■ Fatra anzima tafahoatra ——Mampihena ny habetsaky ny anzima amin'ny elanelam-potoana 0,5 U.
A-4 mari-pana amin'ny Annealing
■ Ambany loatra ny mari-pana amin'ny rindrambaiko —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana fampidirana an-trano na ampiharo ny fomba fanaingoana dingana roa
Kitapo PCR A-5
■ Kitapo PCR be loatra ——Mampihena ny isan'ireo tsingerina PCR.
Primer A-1——Miavaka manokana —— Mamolavola indray ny primer, manova ny toerana sy ny halavan'ny primer hanatsarana ny mampiavaka azy; na manao PCR akany.
ADN modely A-2
——Tsy madio ny môdely ——Ataovy ny môdely na esory ny ADN miaraka amin'ny kitapo fanadiovana.
A-3 Mg2+ fitanana
——Mg2+ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny Mg2+ fifantohana: Manatsara ny Mg2+ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra2+ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.
A-4 dNTP
——Ny haavon'ny dNTP dia avo loatra ——Mampihena araka ny tokony ho izy ny fifantohan'ny dNTP
A-5 mari-pana amin'ny Annealing
——Tena ambany ny mari-pana amin'ny fanaingoana —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny fampidirana annealing
A-6 tsingerina
——Toy ny tsingerina be loatra—— Araraoty ny isan'ny tsingerina
Ny dingana voalohany dia ny mifidy ny polymerase mety. Ny polymerase Taq tsy tapaka dia tsy afaka manamboatra noho ny tsy fisian'ny hetsika exonuclease 3'-5 ', ary ny tsy fitoviana dia hampihena ny fahombiazan'ny sombintsombiny. Noho izany, ny polymerase Taq mahazatra dia tsy afaka manatsara ny sombiny kendrena lehibe kokoa noho ny 5 kb. Taq polymerase miaraka amina fanovana manokana na polymerase fidelity avo lenta hafa dia tokony hofidina hanatsarana ny fahombiazan'ny fanitarana ary hahafeno ny filan'ny fanamafisana sombina lava. Ho fanampin'izany, ny fanamafisana ireo sombintsombiny lava dia mitaky fanitsiana mifanaraka amin'ny famolavolana primer, ny vanim-potoana denaturation, ny fotoana fanitarana, ny buffer pH, sns. Matetika, ny primera misy 18-24 bp dia mety hitarika vokatra tsara kokoa. Mba hisorohana ny fahasimban'ny môdely dia tokony ahena ho 30 seg na latsaka isaky ny tsingerina ny fotoana anaran'ny denaturation, ary ny fotoana hampiakarana ny maripana mankany 94 ° C alohan'ny tokony hampitomboana 1 min. Ankoatr'izay, ny fametrahana ny mari-pana fanitarana eo amin'ny 68 ° C ary ny famolavolana ny fotoana fanitarana arakaraka ny tahan'ny 1 kb / min dia afaka miantoka ny fanamafisana ny sombiny lava.
Ny tahan'ny lesoka amin'ny fanamafisana PCR dia azo ahena amin'ny alàlan'ny fampiasana polymerases ADN isan-karazany miaraka amin'ny fahamendrehana ambony. Anisan'ireo polymerase Taq ADN hita hatreto, ny anzima Pfu dia manana ny tahan'ny lesoka ambany indrindra sy ny fahatokiana avo indrindra (jereo ny tabilao mifatotra). Ankoatry ny fifantina anzima, ny mpikaroka dia afaka mampihena bebe kokoa ny tahan'ny mutation PCR amin'ny alàlan'ny fanatsarana ny fepetra fanehoan-kevitra, ao anatin'izany ny fanamafisana ny fomban'ny buffer, ny fatran'ny polymerase azo hafanaina ary ny fanamafisana ny isa amin'ny tsingerina PCR.
Sokajy vokatra
NAHOANA NO MISAFIDY ANTSIKA
Hatramin'ny nananganana azy, ny orinasanay dia namolavola vokatra kilasy voalohany manaraka ny fitsipika
ny kalitao aloha. Ny vokatray dia nahazo laza tsara eo amin'ny sehatry ny indostria sy ny valisoa eo amin'ireo mpanjifa vaovao sy taloha ..
- Tel: +86 010-59822688
- Tranobe 5, No. 86, lalana Shuangying West, Distrikan'i Changping, Beijing.
- people@tiangen.com
