TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

Fanadiovana haingana ny ADN avy amin'ny fitaovana isan-karazany mba hahitana ny PCR.

Ny TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit dia mandray endrika famonosana tokana izay misy ireo reagents rehetra amin'ny fanomanana ADN genomika haingana sy ny fanamafisana PCR. Izy io dia azo ampiharina amin'ny fanadiovana ADN genome dingana iray avy amin'ny santionany isan-karazany (tavy zavamaniry, masomboly, tavy biby, rà, masirasira ary bakteria) ary ny fanamafisana sy ny fikarohana PCR manaraka. Ny proteinina, ny RNA ary ny fanesorana metabolite faharoa dia tsy ilaina ao anatin'ny fizotry ny fanadiovana manontolo ny fitrandrahana solvent biolojika ary koa ireo dingana etanaol amin'ny étanol, ka mahatonga ny fandidiana ho tsotra sy haingana. Ny kalitaon'ny vokatra dia miorina sy azo antoka.

Ny 2 × Det PCR MasterMix nomen'ity kitapo ity dia reagent PCR mifanentana be izay afaka manatsara tsara ny ADN nefa tsy mila manala ireo loto toy ny proteinina. Ity reagent ity dia misy polymerase Taq DNA, dNTPs, MgCl₂, buffer, ary koa ny enhancer, optimizer ary stabilizer ho an'ny fanehoan-kevitra PCR. Ny fampiharana ny reagent dia mahatonga ny fiasan'ny PCR haingana, tsotra, mora tohina, voafaritra ary milamina. Noho izany, ity kit ity dia mety indrindra amin'ny fizahana avo lenta.

Saka. tsy misy	Haben'ny fonosana
4992527	20 µl × 50 rxn
4992528	20 µl × 200 rxn

Mandefasa mailaka aminay

Product Detail

Ohatra amin'ny fanandramana

FAQ

Product Tags

Toetoetra

■ Tsotra sy haingana: ny ADN avy amin'ny sela samy hafa dia azo alaina ao anatin'ny 5 min raha tsy mila fanadiovana azota azota.
■ Fampiharana marobe: Azo ampiharina amin'ny ravina zavamaniry, masomboly, tavy biby, santionan'ny rà (ra vaovao, anticoagulation, lalan-dra, faritra misy rà maina, sns.), Masirasira ary bakteria.
■ Mifanaraka matanjaka: Ny reagent PCR dia mety amin'ny fanamafisana ny ADN nalaina avy amina loharano samihafa.

Fampiharana

■ Famantarana ny fototarazo: Safidy mety tsara amin'ny famaritana ny général lehibe.

Fanamarihana lehibe

■ Ho an'ny santionany misy fenol avo lenta, toy ny ravina landihazo, ny habetsaky ny santionany dia tokony ho latsaky ny 0,4 mg, raha tsy izany dia hisy fiantraikany eo amin'ny valin'ny PCR.

Ny vokatra rehetra dia azo namboarina ho an'ny ODM / OEM. Ho an'ny antsipiriany,azafady tsindrio ny Serivisy namboarina (ODM / OEM)

Teo aloha: Kitapo fitrandrahana sy fanamafisana ny vokatra GMO

Manaraka: Kitapo PCR mivantana

	Ny ADN dia nalaina avy tamin'ny 5 mg ny ravina sy ny voan'ny katsaka, ny varimbazaha, ny vary, ny soja ary ny landihazo. Ny ADN dia nohamafisin'ny PCR tamin'ny fampiasana primers manokana. ADN 6 μl avy amin'ny eluents 20 μl no nampidirina isaky ny lane. 1: Genome fanaraha-maso tsara; 2: mamela santionany; 3: masomboly voa; 4: NTC; 5: primera D2000
	M: TIANGEN Marker D2000; 1: Fanaraha-maso tsara; 2-7: Ny isan'ireo teboka rà maina amin'ny sivana dia 1-6 avy; 8: Fanaraha-maso ratsy. Ny puncher 3 mm dia nampiasaina hanala ireo rà maina tamin'ny sivana ho toy ny fitaovana hanaovana ilay fitsapana fitrandrahana. ADN 6 μl avy amin'ny eluents 20 μl no nampidirina isaky ny lane.
	M: TIANGEN Marker D2000; 1: Fanaraha-maso tsara (nampiasaina ho modely ny ADN genomika); 2-7: Ny habetsaky ny rà ampiana dia 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl ary 60 μl, avy; 8-13: Ny habetsaky ny rà ampiana dia 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl ary 60 μl, avy; 14: NTC. ADN 6 μl avy amin'ny eluents 20 μl total no napetraka tao amin'ny gel agarose.

F: Tsy misy tarika fanamafisana

Modely A-1

■ Ny môdely dia misy fahalotoana proteinina na mpanakana Taq, sns .——Ataovy ny môdely ADN, esory ny fahalotoan'ny proteinina na esory ny modely ADN miaraka amina kitapo fanadiovana.

■ Tsy feno ny denaturation an'ny môdely —— Ampitomboina araka ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny denaturation ary halavaina ny fotoana maha-denaturation.

■ Fanimbana ny môdely —— Amboary indray ny modely.

A-2 Primer

■ Ratsy kalitaon'ny primera ——Avao-synthesize ny primer.

■ Fanapotehana ny primer ——Aokao ireo primera fitanana avo lenta ho kely kely hitehirizana azy. Sorohy ny hatsiaka be loatra sy ny fanalefaka na 4 ° C maharitra maharitra.

■ Famolavolana primer tsy mety (oh: ny halavan'ny primer tsy ampy, dimer miforona eo anelanelan'ny primers sns.

A-3 Mg²⁺fitanana

■ Mg²⁺ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg²⁺fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-4 mari-pana amin'ny Annealing

■ Ny mari-pana amin'ny annealing avo dia misy fiatraikany amin'ny famehezana ny primer sy ny modely. ——Ahena ny mari-pana mampifangaro ary manatsara ny toe-javatra amin'ny alàlan'ny gradient 2 ° C.

A-5 Fotoana fanitarana

■ Fotoana fanitarana fohy —— Ampitomboy ny fotoana fanitarana.

F: Diso tsara

Phenomena: ny santionany ratsy dia mampiseho ireo tarika lasibatra kendrena.

A-1 Fandotoana ny PCR

■ Fandotoana ny filaharan'ny tanjona na ny fanamafisana ny vokatra —— Tandremo sao ampifangaroina ny santionany misy ny filaharana kendrena ao amin'ilay santionany ratsy na arotsaka ao anaty fantsona centrifuge. Ny reagents na ny fitaovana dia tokony autoclaved hamongorana ny asidra niokika misy, ary ny fisian'ny fandotoana dia tokony ho faritana amin'ny alàlan'ny fanandramana fanaraha-maso ratsy.

■ Fandotoana reagent ——Aroquot ny reagents ary tahirizo amin'ny hafanana ambany.

A-2 Primer

■ Mg²⁺ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg²⁺ fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

■ Famolavolana primer tsy mety, ary ny filaharana kendrena dia misy homolojia miaraka amin'ny filaharana tsy kendrena. —— primera famolavolana indray.

F: fanamafisana tsy voafaritra

Phenomena: Ny tariby fanamafisana PCR dia tsy mifanaraka amin'ny haben'ny antenaina, na lehibe na kely, na indraindray samy misy tarika fanamafisana manokana sy tarika fanamafisana tsy voafaritra.

Primer A-1

■ Tsy fahaiza-manao voalohany

—— Primera famolavolana indray.

■ Avo loatra ny fatran'ny primer ——Mampiakatra tsara ny mari-pana amin'ny denaturation ary mampaharitra ny fotoana maha-denaturation.

A-2 Mg²⁺ fitanana

■ Ny Mg²⁺ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny fatran'ny Mg2 +: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-3 Polymerase maharitra

■ Fatra anzima tafahoatra ——Mampihena ny habetsaky ny anzima amin'ny elanelam-potoana 0,5 U.

A-4 mari-pana amin'ny Annealing

■ Ambany loatra ny mari-pana amin'ny rindrambaiko —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana fampidirana an-trano na ampiharo ny fomba fanaingoana dingana roa

Kitapo PCR A-5

■ Kitapo PCR be loatra ——Mampihena ny isan'ireo tsingerina PCR.

F: Tarika mitambatra na manosotra

Primer A-1——Miavaka manokana —— Mamolavola indray ny primer, manova ny toerana sy ny halavan'ny primer hanatsarana ny mampiavaka azy; na manao PCR akany.

ADN modely A-2

——Tsy madio ny môdely ——Ataovy ny môdely na esory ny ADN miaraka amin'ny kitapo fanadiovana.

A-3 Mg²⁺ fitanana

——Mg²⁺ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny Mg²⁺ fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-4 dNTP

——Ny haavon'ny dNTP dia avo loatra ——Mampihena araka ny tokony ho izy ny fifantohan'ny dNTP

A-5 mari-pana amin'ny Annealing

——Tena ambany ny mari-pana amin'ny fanaingoana —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny fampidirana annealing

A-6 tsingerina

——Toy ny tsingerina be loatra—— Araraoty ny isan'ny tsingerina

F: Ohatrinona ny ADN modely tokony ampiana ao anaty rafitra fanehoan-kevitra 50 μl PCR?

F: Ahoana ny fanamafisana ireo sombina lava?

Ny dingana voalohany dia ny mifidy ny polymerase mety. Ny polymerase Taq tsy tapaka dia tsy afaka manamboatra noho ny tsy fisian'ny hetsika exonuclease 3'-5 ', ary ny tsy fitoviana dia hampihena ny fahombiazan'ny sombintsombiny. Noho izany, ny polymerase Taq mahazatra dia tsy afaka manatsara ny sombiny kendrena lehibe kokoa noho ny 5 kb. Taq polymerase miaraka amina fanovana manokana na polymerase fidelity avo lenta hafa dia tokony hofidina hanatsarana ny fahombiazan'ny fanitarana ary hahafeno ny filan'ny fanamafisana sombina lava. Ho fanampin'izany, ny fanamafisana ireo sombintsombiny lava dia mitaky fanitsiana mifanaraka amin'ny famolavolana primer, ny vanim-potoana denaturation, ny fotoana fanitarana, ny buffer pH, sns. Matetika, ny primera misy 18-24 bp dia mety hitarika vokatra tsara kokoa. Mba hisorohana ny fahasimban'ny môdely dia tokony ahena ho 30 seg na latsaka isaky ny tsingerina ny fotoana anaran'ny denaturation, ary ny fotoana hampiakarana ny maripana mankany 94 ° C alohan'ny tokony hampitomboana 1 min. Ankoatr'izay, ny fametrahana ny mari-pana fanitarana eo amin'ny 68 ° C ary ny famolavolana ny fotoana fanitarana arakaraka ny tahan'ny 1 kb / min dia afaka miantoka ny fanamafisana ny sombiny lava.

F: Ahoana no hanatsarana ny fahatokisan'ny PCR?

Ny tahan'ny lesoka amin'ny fanamafisana PCR dia azo ahena amin'ny alàlan'ny fampiasana polymerases ADN isan-karazany miaraka amin'ny fahamendrehana ambony. Anisan'ireo polymerase Taq ADN hita hatreto, ny anzima Pfu dia manana ny tahan'ny lesoka ambany indrindra sy ny fahatokiana avo indrindra (jereo ny tabilao mifatotra). Ankoatry ny fifantina anzima, ny mpikaroka dia afaka mampihena bebe kokoa ny tahan'ny mutation PCR amin'ny alàlan'ny fanatsarana ny fepetra fanehoan-kevitra, ao anatin'izany ny fanamafisana ny fomban'ny buffer, ny fatran'ny polymerase azo hafanaina ary ny fanamafisana ny isa amin'ny tsingerina PCR.

Soraty eto ny hafatrao ary andefaso aminay