Kitapo fitrandrahana sy fanamafisana ny vokatra GMO

Mety indrindra amin'ny fitrandrahana GMO Crop sy ny fitiliana PCR transgenika.

Ny Kit ny fikajiana ny vokatra GMO & Amplification Kit dia novolavolaina manokana mba hahitan'ny PCR ny vokatra GMO. Ny buffer lysis tsy manam-paharoa voarakitra ao amin'ny Fizarana A amin'ny kit dia afaka misintona manokana ny vatan'ny zava-maniry fototra - ny varimbazaha, katsaka, vary, landihazo ary soja, mba hamoahana ireo singa mifandraika amin'izany toy ny asidra niokleika sy ny proteinina. Ny fitrandrahana phenol / chloroform miaraka amin'ny RNase manokana dia afaka manadio ny ADN genomika madio madio tsy misy loto toy ny RNA, proteinina ary ion-by. Ny ADN voadio dia azo ampiharina amin'ny detection PCR manaraka. Ny fizarana B amin'ny kitapo dia rafitra fanehoan-kevitra tsotra roa an'ny PCR misy 2 × GMO PCR Buffer sy GMO DNA Polymerase. GMO DNA Polymerase dia polymerase azo hafanaina miovaova miaraka amin'ny antiôdôma. Ny buffer 2 × GMO PCR dia misy singa samihafa toa ny MgCl₂, dNTPs, stabilizer fanehoan-kevitra PCR, optimizer ary enhancer amin'ny fatran'ny 2 × GMO. Izy io dia manana tombony amin'ny fiasa haingana sy tsotra, ny fahatsapana avo, ny fahamendrehana matanjaka, ny fitoniana tsara, sns. Azo ampiasaina miaraka amin'ny Fizarana A ho an'ny fikajiana PCR transgenika vokatra GMO.

Saka. tsy misy	Haben'ny fonosana
4992905	200 rxn

Mandefasa mailaka aminay

Product Detail

Ohatra amin'ny fanandramana

FAQ

Product Tags

Toetoetra

■ Fampiharana malalaka: Ity kit ity dia afaka mamoaka ADN genomika avo lenta amin'ny vokatra GMO dimy lehibe.
■ Tsotra sy haingana: ny fitrandrahana GMO voa genomika dia azo vita ao anatin'ny 2 ora. Tsy mila centrifuges frizidera lehibe, takiana ambany amin'ny fitaovana sy ny fitaovana. Mety amin'ny fitrandrahana ADN genomika haingana ny vokatra GMO amin'ny ambaratonga andrim-pikarohana rehetra.
■ Fahombiazana avo lenta sy famaritana: Ny buffer tokana an'ny polymerase Taq nohavaozin'ny antibody dia manome toky ny fanamafisana polymerase mahomby, izay voafaritra kokoa noho ny polymerase Taq mahazatra.

Fampiharana

Ny kit dia afaka mamoaka ADN genomika avo lenta avy amin'ny voly GMO lehibe toy ny varimbazaha, katsaka, vary, landihazo ary soja, ary manao detection PCR transgenic amin'ny voly GMO.

Ny vokatra rehetra dia azo namboarina ho an'ny ODM / OEM. Ho an'ny antsipiriany,azafady tsindrio ny Serivisy namboarina (ODM / OEM)

Teo aloha: FastKing One dingana RT-qPCR Kit (Probe)

Manaraka: TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit

Fitrandrahana ADN genomika
Ny fitrandrahana ADN genomika dia natao tamin'ny ravina vary 100, katsaka, soja, landihazo ary varimbazaha, tsirairay avy. Naverina indroa ilay andrana. ADN 3 μl avy amin'ny eluents 100 μl total no nampidirina isaky ny lane.
Ny fifantohan'ny gel agarose dia 2%. Ny electrophoresis dia natao ambanin'ny 6 V / cm nandritra ny 20 min.
D15000: Fanamarihana ADN TIANGEN D15000.

Famantarana PCR
ADN Genomika ny vary, katsaka, soja, landihazo ary varimbazaha dia nohamafisina tsirairay avy. Naverina indroa ilay andrana. 6 μl avy amin'ny rafitra fanehoan-kevitra 20 μl feno no nampidirina isaky ny lane.
Ny fifantohan'ny gel agarose dia 2%. Ny electrophoresis dia natao ambanin'ny 6 V / cm nandritra ny 20 min.
D15000: Fanamarihana ADN TIANGEN D15000.

F: Tsy misy tarika fanamafisana

Modely A-1

■ Ny môdely dia misy fahalotoana proteinina na mpanakana Taq, sns .——Ataovy ny môdely ADN, esory ny fahalotoan'ny proteinina na esory ny modely ADN miaraka amina kitapo fanadiovana.

■ Tsy feno ny denaturation an'ny môdely —— Ampitomboina araka ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny denaturation ary halavaina ny fotoana maha-denaturation.

■ Fanimbana ny môdely —— Amboary indray ny modely.

A-2 Primer

■ Ratsy kalitaon'ny primera ——Avao-synthesize ny primer.

■ Fanapotehana ny primer ——Aokao ireo primera fitanana avo lenta ho kely kely hitehirizana azy. Sorohy ny hatsiaka be loatra sy ny fanalefaka na 4 ° C maharitra maharitra.

■ Famolavolana primer tsy mety (oh: ny halavan'ny primer tsy ampy, dimer miforona eo anelanelan'ny primers sns.

A-3 Mg²⁺fitanana

■ Mg²⁺ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg²⁺fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-4 mari-pana amin'ny Annealing

■ Ny mari-pana amin'ny annealing avo dia misy fiatraikany amin'ny famehezana ny primer sy ny modely. ——Ahena ny mari-pana mampifangaro ary manatsara ny toe-javatra amin'ny alàlan'ny gradient 2 ° C.

A-5 Fotoana fanitarana

■ Fotoana fanitarana fohy —— Ampitomboy ny fotoana fanitarana.

F: Diso tsara

Phenomena: ny santionany ratsy dia mampiseho ireo tarika lasibatra kendrena.

A-1 Fandotoana ny PCR

■ Fandotoana ny filaharan'ny tanjona na ny fanamafisana ny vokatra —— Tandremo sao ampifangaroina ny santionany misy ny filaharana kendrena ao amin'ilay santionany ratsy na arotsaka ao anaty fantsona centrifuge. Ny reagents na ny fitaovana dia tokony autoclaved hamongorana ny asidra niokika misy, ary ny fisian'ny fandotoana dia tokony ho faritana amin'ny alàlan'ny fanandramana fanaraha-maso ratsy.

■ Fandotoana reagent ——Aroquot ny reagents ary tahirizo amin'ny hafanana ambany.

A-2 Primer

■ Mg²⁺ ambany loatra ny fifantohana —— Ampitomboy tsara ny Mg²⁺ fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

■ Famolavolana primer tsy mety, ary ny filaharana kendrena dia misy homolojia miaraka amin'ny filaharana tsy kendrena. —— primera famolavolana indray.

F: fanamafisana tsy voafaritra

Phenomena: Ny tariby fanamafisana PCR dia tsy mifanaraka amin'ny haben'ny antenaina, na lehibe na kely, na indraindray samy misy tarika fanamafisana manokana sy tarika fanamafisana tsy voafaritra.

Primer A-1

■ Tsy fahaiza-manao voalohany

—— Primera famolavolana indray.

■ Avo loatra ny fatran'ny primer ——Mampiakatra tsara ny mari-pana amin'ny denaturation ary mampaharitra ny fotoana maha-denaturation.

A-2 Mg²⁺ fitanana

■ Ny Mg²⁺ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny fatran'ny Mg2 +: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-3 Polymerase maharitra

■ Fatra anzima tafahoatra ——Mampihena ny habetsaky ny anzima amin'ny elanelam-potoana 0,5 U.

A-4 mari-pana amin'ny Annealing

■ Ambany loatra ny mari-pana amin'ny rindrambaiko —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana fampidirana an-trano na ampiharo ny fomba fanaingoana dingana roa

Kitapo PCR A-5

■ Kitapo PCR be loatra ——Mampihena ny isan'ireo tsingerina PCR.

F: Tarika mitambatra na manosotra

Primer A-1——Miavaka manokana —— Mamolavola indray ny primer, manova ny toerana sy ny halavan'ny primer hanatsarana ny mampiavaka azy; na manao PCR akany.

ADN modely A-2

——Tsy madio ny môdely ——Ataovy ny môdely na esory ny ADN miaraka amin'ny kitapo fanadiovana.

A-3 Mg²⁺ fitanana

——Mg²⁺ avo loatra ny fifantohana ——Ahenao tsara ny Mg²⁺ fifantohana: Manatsara ny Mg²⁺ fifantohana amina andiana fanehoan-kevitra avy amin'ny 1 mM ka hatramin'ny 3 mM miaraka amin'ny elanelam-potoana 0,5 mM hamaritana ny Mg mety indrindra²⁺ fifantohana isaky ny modely sy ny primer.

A-4 dNTP

——Ny haavon'ny dNTP dia avo loatra ——Mampihena araka ny tokony ho izy ny fifantohan'ny dNTP

A-5 mari-pana amin'ny Annealing

——Tena ambany ny mari-pana amin'ny fanaingoana —— Ampitomboy amin'ny tokony ho izy ny mari-pana amin'ny fampidirana annealing

A-6 tsingerina

——Toy ny tsingerina be loatra—— Araraoty ny isan'ny tsingerina

F: Ohatrinona ny ADN modely tokony ampiana ao anaty rafitra fanehoan-kevitra 50 μl PCR?

F: Ahoana ny fanamafisana ireo sombina lava?

Ny dingana voalohany dia ny mifidy ny polymerase mety. Ny polymerase Taq tsy tapaka dia tsy afaka manamboatra noho ny tsy fisian'ny hetsika exonuclease 3'-5 ', ary ny tsy fitoviana dia hampihena ny fahombiazan'ny sombintsombiny. Noho izany, ny polymerase Taq mahazatra dia tsy afaka manatsara ny sombiny kendrena lehibe kokoa noho ny 5 kb. Taq polymerase miaraka amina fanovana manokana na polymerase fidelity avo lenta hafa dia tokony hofidina hanatsarana ny fahombiazan'ny fanitarana ary hahafeno ny filan'ny fanamafisana sombina lava. Ho fanampin'izany, ny fanamafisana ireo sombintsombiny lava dia mitaky fanitsiana mifanaraka amin'ny famolavolana primer, ny vanim-potoana denaturation, ny fotoana fanitarana, ny buffer pH, sns. Matetika, ny primera misy 18-24 bp dia mety hitarika vokatra tsara kokoa. Mba hisorohana ny fahasimban'ny môdely dia tokony ahena ho 30 seg na latsaka isaky ny tsingerina ny fotoana anaran'ny denaturation, ary ny fotoana hampiakarana ny maripana mankany 94 ° C alohan'ny tokony hampitomboana 1 min. Ankoatr'izay, ny fametrahana ny mari-pana fanitarana eo amin'ny 68 ° C ary ny famolavolana ny fotoana fanitarana arakaraka ny tahan'ny 1 kb / min dia afaka miantoka ny fanamafisana ny sombiny lava.

F: Ahoana no hanatsarana ny fahatokisan'ny PCR?

Ny tahan'ny lesoka amin'ny fanamafisana PCR dia azo ahena amin'ny alàlan'ny fampiasana polymerases ADN isan-karazany miaraka amin'ny fahamendrehana ambony. Anisan'ireo polymerase Taq ADN hita hatreto, ny anzima Pfu dia manana ny tahan'ny lesoka ambany indrindra sy ny fahatokiana avo indrindra (jereo ny tabilao mifatotra). Ankoatry ny fifantina anzima, ny mpikaroka dia afaka mampihena bebe kokoa ny tahan'ny mutation PCR amin'ny alàlan'ny fanatsarana ny fepetra fanehoan-kevitra, ao anatin'izany ny fanamafisana ny fomban'ny buffer, ny fatran'ny polymerase azo hafanaina ary ny fanamafisana ny isa amin'ny tsingerina PCR.

Soraty eto ny hafatrao ary andefaso aminay