■ Fahadiovana avo lenta: manala ny ankamaroan'ny loto ny membrane silika.
■ Fampiasana midadasika: Mety amin'ny ra anticoagulant (EDTA, heparin sns), palitao buffy ary lalan-dra.
■ Fandidiana haingana: Ny ADN Genomika dia azo alaina ao anatin'ny adiny 1.
Karazana: miorina amin'ny tsanganana spin
Sample sy volavola fanombohana: 100-1000 μl ra manontolo avy amin'ny mammalian, 5-20 μl ra manontolo avy amin'ny vorona na amphibian, 200-1000 μl ra
Tanjona: ADN Genomika.
Vokatra: 3-40 μg
Fotoana iasana: ~ 1 ora
Fampiharana any ambany: fandevonan-kanina ny anzima famerana, famakafakana PCR, Fototra atsimo, hybridisation chip, fananganana tranomboky NGS, sns.
1. Mba hanesorana ireo sisa tavela amin'ny RNA, ny vahaolana RNase A (100 mg / ml) dia mila omanina samirery.
2. Ity vokatra ity dia voasoratra anarana ho kilasy I in vitrompamantatra diagnostika nataon'i Beijing FDA. Mifandraisa azafady TIANGEN raha mila fanazavana fanampiny.
Ny vokatra rehetra dia azo namboarina ho an'ny ODM / OEM. Ho an'ny antsipiriany,azafady tsindrio ny Serivisy namboarina (ODM / OEM)
ADN genomika dia nalaina avy tamin'ny santionan'ny ra izay nampiasa ny TIANamp Blood DNA Kit. M: TIANGEN Marker D15000. Santionany: rà anticoagulation olombelona 200 μl miaraka amin'ny EDTA, EDTA / NaF, heparin ary sodium citrate; palitao buffy avy amin'ny ra 2 ml; Ra akoho 10 μl sy rà voalavo 200 μl. Ho an'ny palitao buffy, 2 μl an'ny elatra 100 μl dia navoaka; ho an'ny hafa dia 4 μl an'ny elatra 100 μl no nampidirina isaky ny lanezy. Valim-panandramana: Kit Kit ny Rà TIANamp dia azo ampiharina amin'ny fanadiovana ADN avo lenta avy amin'ny anticoagulants olombelona miaraka amin'ny fitsaboana isan-karazany ary koa ny ra avy amin'ny karazany isan-karazany. |
|
Fampitahana ny ADN genomika nalaina avy amin'ny anticoagulation olombelona 200 μl tamin'ny EDTA izay nampiasa ny TIANamp Blood DNA Kit sy vokatra mitovy amin'ny mpamatsy hafa. M: TIANGEN Marker D15000. 4 μl eluates 100 μl no nampidirina isaky ny lanezy. Valim-panandramana: Raha ampitahaina amin'ny mpamatsy hafa, Kit Kit ny Rà TIANamp dia afaka mahazo gDNA ambony ra. |
A-1 Fibebahana sela na virus kely ao amin'ny santionany fanombohana - Manatsara ny fatran'ny sela na virus.
A-2 Lysis tsy ampy amin'ny santionany - Ireo santionany dia tsy mbola nafangaro tsara tamin'ny buffer lysis. Soso-kevitra ny afangaro amin'ny vortexing mandritra ny 1-2 fotoana. —Lisis tsy ampy ny sela ateraky ny fihenan'ny proteinase K. —Lysis tsy misy sela na fahasimban'ny proteinina noho ny fotoana tsy ampy amin'ny fandroana mafana. Soso-kevitra ny hanapaka kely ilay sela ary hanitatra ny fotoana fandroana mba hanesorana ireo sisa tavela ao anaty lysate.
A-3 Adsorption ADN tsy ampy. —Tsy nasiana éthanol na isan-jato ambany fa tsy éthanol 100% alohan'ny namindrana ny lysate ho any amin'ny tsanganana fihodinana.
A-4 Ny sanda pH amin'ny buffer elution dia ambany loatra. - Amboary ny pH hatramin'ny 8.0-8.3.
Ethanol sisa tavela amin'ny eluent.
—Misy sisa tavela buffer PW ao amin'ny eluent. Ny etanol dia azo esorina amin'ny alàlan'ny fanodinana ny tsanganana fihodinana mandritra ny 3-5 min, ary avy eo apetraka amin'ny hafanan'ny efitrano na «incubator» 50 for mandritra ny 1-2 min.
A-1 Ny santionany dia tsy vaovao. —Mindrà ADN santionany tsara ho fanaraha-maso hamaritana raha efa simba ny ADN tao amin'ilay santionany.
A-2 Fitsaboana mialoha tsy mety. —Ny antony nitotoan'ny nitroka ranoka be loatra, ny fahazoana indray ny hamandoana, na ny haben'ny santionany.
Ny pretreatment dia tokony miovaova amin'ny santionany isan-karazany. Ho an'ny santionan'ny zavamaniry, alao antoka fa hikororoka tsara ny azota azota. Ho an'ny santionan'ny biby, homogenate na totoina totozy azota. Ho an'ireo santionany misy rindrin'ny sela izay sarotra vakiana, toy ny bakteria G + sy ny masirasira, dia soso-kevitra ny hampiasa lysozyme, lyticase na fomba mekanika handravana ireo rindrin'ny sela.
4992201/4992202 Kit Genomic DNA Kit dia mampiasa fomba miorina amin'ny tsanganana izay mitaky kloroform amin'ny fitrandrahana. Izy io dia mety indrindra amin'ny santionan'ny zavamaniry isan-karazany, ary koa vovo-tany maina. Ny Kit Fambolena Hi-DNAsecure dia miorina amin'ny tsanganana ihany koa, saingy tsy mila fitrandrahana phenol / chloroform, mahatonga azy io ho azo antoka sy tsy misy poizina. Izy io dia mety amin'ny zavamaniry misy polysaccharides avo sy atiny polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System dia mampiasa fomba miorina amin'ny rano. Ny fitrandrahana Phenol / chloroform dia tsy ilaina koa. Ny fomba fidiovana dia tsotra sy haingana ary tsy misy fetra ho an'ny santionany fanombohana, amin'izay ny mpampiasa dia afaka manitsy ny vola miovaova arakaraka ny fepetra takiana amin'ny fanandramana. Ny sombina gDNA haben'ny habe dia azo raisina amin'ny vokatra avo.
Ny fitrandrahana ADN dia azo tanterahina amin'ny alàlan'ny reagents omena amin'ireto kitapo roa ireto amin'ny fanovana tsotra izao ny protokoleta amin'ny torolàlana manokana momba ny fitrandrahana ADN. Ny kopia malefaka an'ny protokolon'ny fitrandrahana ADN dia azo avoaka rehefa mangataka.
Atsaharo ny santionany vaovao amin'ny PBS 1 ml, sira masira na buffer TE. Homogenize tanteraka ny santionany amin'ny alàlan'ny homogenizer iray ary angony ny fantsona mankany amin'ny faran'ny fantsona iray amin'ny alàlan'ny centrifuging. Atsipazo ny supernatant, ary avereno ampidirina amina buffer 200 μl buffer ny GA. Ity fanadiovana ADN manaraka ity dia azo tanterahina arakaraka ny torolalana.
Ho an'ny fanadiovana gDNA amin'ny plasma, serum ary santionan'ny tsiranoka amin'ny vatana, TIANamp Micro DNA Kit no tolo-kevitra. Ho an'ny fanadiovana ny virus gDNA amin'ny santionany / plasma, TIANamp Virus DNA / RNA Kit no tondroina. Ho an'ny fanadiovana gDNA amin'ny bakteria avy amin'ny santionan'ny serum sy plasma, dia tolo-kevitra ny Kit Kit ny bakteria TIANamp Bacteria (tokony ampidirina amin'ny bakteria tsara ny lysozyme). Ho an'ny santionan'ny rora, kitapo Hi-Swab DNA Kit ary Kit Kit ny bakteria TIANamp Bacteria no tolo-kevitra.
Kitapo zavamaniry DNAsecure na System DNAquick Plant dia ampirisihina hitrandrahana génomine holatra. Ho an'ny fitrandrahana genome masirasira, kitapo ADN TIANamp yeast (1) tokony omanina ny lyticase.
Hatramin'ny nananganana azy, ny orinasanay dia namolavola vokatra kilasy voalohany manaraka ny fitsipika
ny kalitao aloha. Ny vokatray dia nahazo laza tsara eo amin'ny sehatry ny indostria sy ny valisoa eo amin'ireo mpanjifa vaovao sy taloha ..