Kitapo ADN an'ny zavamaniry TGuide S32

A-1 Fibebahana sela na virus kely ao amin'ny santionany fanombohana - Manatsara ny fatran'ny sela na virus.

A-2 Lysis tsy ampy amin'ny santionany - Ireo santionany dia tsy mbola nafangaro tsara tamin'ny buffer lysis. Soso-kevitra ny afangaro amin'ny vortexing mandritra ny 1-2 fotoana. —Lisis tsy ampy ny sela ateraky ny fihenan'ny proteinase K. —Lysis tsy misy sela na fahasimban'ny proteinina noho ny fotoana tsy ampy amin'ny fandroana mafana. Soso-kevitra ny hanapaka kely ilay sela ary hanitatra ny fotoana fandroana mba hanesorana ireo sisa tavela ao anaty lysate.

A-3 Adsorption ADN tsy ampy. —Tsy nasiana éthanol na isan-jato ambany fa tsy éthanol 100% alohan'ny namindrana ny lysate ho any amin'ny tsanganana fihodinana.

A-4 Ny sanda pH amin'ny buffer elution dia ambany loatra. - Amboary ny pH hatramin'ny 8.0-8.3.

Ethanol sisa tavela amin'ny eluent.

—Misy sisa tavela buffer PW ao amin'ny eluent. Ny etanol dia azo esorina amin'ny alàlan'ny fanodinana ny tsanganana fihodinana mandritra ny 3-5 min, ary avy eo apetraka amin'ny hafanan'ny efitrano na «incubator» 50 for mandritra ny 1-2 min.

A-1 Ny santionany dia tsy vaovao. —Mindrà ADN santionany tsara ho fanaraha-maso hamaritana raha efa simba ny ADN tao amin'ilay santionany.

A-2 Fitsaboana mialoha tsy mety. —Ny antony nitotoan'ny nitroka ranoka be loatra, ny fahazoana indray ny hamandoana, na ny haben'ny santionany.

Ny pretreatment dia tokony miovaova amin'ny santionany isan-karazany. Ho an'ny santionan'ny zavamaniry, alao antoka fa hikororoka tsara ny azota azota. Ho an'ny santionan'ny biby, homogenate na totoina totozy azota. Ho an'ireo santionany misy rindrin'ny sela izay sarotra vakiana, toy ny bakteria G + sy ny masirasira, dia soso-kevitra ny hampiasa lysozyme, lyticase na fomba mekanika handravana ireo rindrin'ny sela.

4992201/4992202 Kit Genomic DNA Kit dia mampiasa fomba miorina amin'ny tsanganana izay mitaky kloroform amin'ny fitrandrahana. Izy io dia mety indrindra amin'ny santionan'ny zavamaniry isan-karazany, ary koa vovo-tany maina. Ny Kit Fambolena Hi-DNAsecure dia miorina amin'ny tsanganana ihany koa, saingy tsy mila fitrandrahana phenol / chloroform, mahatonga azy io ho azo antoka sy tsy misy poizina. Izy io dia mety amin'ny zavamaniry misy polysaccharides avo sy atiny polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System dia mampiasa fomba miorina amin'ny rano. Ny fitrandrahana Phenol / chloroform dia tsy ilaina koa. Ny fomba fidiovana dia tsotra sy haingana ary tsy misy fetra ho an'ny santionany fanombohana, amin'izay ny mpampiasa dia afaka manitsy ny vola miovaova arakaraka ny fepetra takiana amin'ny fanandramana. Ny sombina gDNA haben'ny habe dia azo raisina amin'ny vokatra avo.

Ny ADN genomika dia nalaina avy tamin'ny habetsaky ny santionan'ny ra iray manontolo tamin'ny alàlan'ny TIANamp Blood DNA Kit. Ny valiny dia toy izao manaraka izao. Ny valiny dia voatanisa ho referansa fotsiny, ny valin'ny fitrandrahana tena izy dia miankina amin'ny toe-javatra santionany.

Ny fitrandrahana ADN dia azo tanterahina amin'ny alàlan'ny reagents omena amin'ireto kitapo roa ireto amin'ny fanovana tsotra izao ny protokoleta amin'ny torolàlana manokana momba ny fitrandrahana ADN. Ny kopia malefaka an'ny protokolon'ny fitrandrahana ADN dia azo avoaka rehefa mangataka.

Atsaharo ny santionany vaovao amin'ny PBS 1 ml, sira masira na buffer TE. Homogenize tanteraka ny santionany amin'ny alàlan'ny homogenizer iray ary angony ny fantsona mankany amin'ny faran'ny fantsona iray amin'ny alàlan'ny centrifuging. Atsipazo ny supernatant, ary avereno ampidirina amina buffer 200 μl buffer ny GA. Ity fanadiovana ADN manaraka ity dia azo tanterahina arakaraka ny torolalana.

Ho an'ny fanadiovana gDNA amin'ny plasma, serum ary santionan'ny tsiranoka amin'ny vatana, TIANamp Micro DNA Kit no tolo-kevitra. Ho an'ny fanadiovana ny virus gDNA amin'ny santionany / plasma, TIANamp Virus DNA / RNA Kit no tondroina. Ho an'ny fanadiovana gDNA amin'ny bakteria avy amin'ny santionan'ny serum sy plasma, dia tolo-kevitra ny Kit Kit ny bakteria TIANamp Bacteria (tokony ampidirina amin'ny bakteria tsara ny lysozyme). Ho an'ny santionan'ny rora, kitapo Hi-Swab DNA Kit ary Kit Kit ny bakteria TIANamp Bacteria no tolo-kevitra.

Kitapo zavamaniry DNAsecure na System DNAquick Plant dia ampirisihina hitrandrahana génomine holatra. Ho an'ny fitrandrahana genome masirasira, kitapo ADN TIANamp yeast (1) tokony omanina ny lyticase.